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大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA檢測試劑盒技術(shù)說明書
BS-2901大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒
一、產(chǎn)品概述
本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術(shù)，專用于體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿等樣本中第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)的濃度。其核心原理為：預(yù)包被抗體的微孔板捕獲樣本中的FⅧAg，再通過酶標(biāo)記抗體形成復(fù)合物，經(jīng)底物顯色后，通過酶標(biāo)儀測定吸光度(OD值)，濃度與顯色強(qiáng)度呈正相關(guān)?。該技術(shù)具有高靈敏度(檢測限低至0.008 IU/mL)和特異性，適用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床診斷?。
二、試劑盒組成
預(yù)包被微孔板?：96孔格式，含固定化捕獲抗體?。
校準(zhǔn)品?：標(biāo)準(zhǔn)濃度梯度(如80、40、20、10、5、2.5 U/L)，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
對照品?：陰性對照和陽性對照血漿，驗證實驗有效性?。
酶標(biāo)記物?：辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體?。
底物溶液?：TMB顯色液，反應(yīng)后呈藍(lán)色，終止后轉(zhuǎn)黃色?。
終止液?：硫酸溶液，終止酶促反應(yīng)。
樣本稀釋液?：用于樣本預(yù)處理，避免高濃度樣本超出檢測范圍。
洗滌緩沖液?：濃縮液，需按比例稀釋使用?。
三、樣本處理與保存
血清/血漿?：離心分離(3000×g，10分鐘)，避免溶血或脂血;EDTA、肝素或檸檬酸鹽抗凝血漿均可使用。
組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清。
保存條件?：短期(2-8℃)或長期(-70℃)保存，避免反復(fù)凍融;室溫解凍后充分混勻。
四、操作步驟
準(zhǔn)備試劑?：室溫平衡試劑20分鐘，洗滌緩沖液稀釋后使用?。
加樣?：每孔加入50μL樣本或校準(zhǔn)品，37℃孵育1小時。
洗滌?：棄液后，洗滌緩沖液清洗3次，每次3分鐘?。
加酶標(biāo)記物?：加入HRP標(biāo)記抗體，37℃孵育1小時?。
再次洗滌?：重復(fù)洗滌步驟?。
顯色?：加入TMB底物，37℃避光孵育10-30分鐘。
終止反應(yīng)?：加入終止液，溶液由藍(lán)轉(zhuǎn)黃?。
檢測?：酶標(biāo)儀450nm波長測定OD值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度。
五、注意事項
操作規(guī)范?：嚴(yán)格遵循孵育時間和溫度，避免交叉污染?。
樣本要求?：避免溶血或高脂樣本，稀釋后檢測超出范圍的樣本。
試劑保存?：2-8℃避光保存，有效期6個月;濃縮洗滌液需溶解后使用?。
儀器校準(zhǔn)?：使用高精度加樣器(0.5-1000μL)和450nm酶標(biāo)儀。
安全提示?：僅限科研用途，操作時佩戴防護(hù)裝備?。
六、性能驗證
靈敏度?：檢測限低至0.008 IU/mL，可準(zhǔn)確識別低濃度樣本?。
精密度?：板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間變異系數(shù)<15%，確保結(jié)果重現(xiàn)性?。
線性范圍?：標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋2.5-80 U/L，樣本稀釋后仍保持線性。
特異性?：與結(jié)構(gòu)類似物無交叉反應(yīng)，避免假陽性?。
七、應(yīng)用范圍
本試劑盒適用于大鼠FⅧAg的定量分析，支持疾病機(jī)制研究、藥物開發(fā)等科研場景，提供穩(wěn)定可靠的檢測數(shù)據(jù)。
注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
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