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大鼠α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
BS-8515 大鼠α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒
大鼠α-SMA(α-平滑肌肌動(dòng)蛋白)ELISA試劑盒基于抗原-抗體特異性結(jié)合反應(yīng),通過酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)定量檢測(cè)樣本中α-SMA的濃度。其核心原理和步驟可概括如下:
1. ?抗原-抗體結(jié)合?
微孔板預(yù)包被抗α-SMA單克隆抗體,加入樣本后,樣本中的α-SMA與固相抗體結(jié)合形成復(fù)合物?。
未結(jié)合的雜質(zhì)通過洗滌步驟去除,確保特異性結(jié)合?。
2. ?酶標(biāo)記二抗反應(yīng)?
加入酶標(biāo)二抗(如HRP標(biāo)記的抗α-SMA抗體),與已結(jié)合的抗原-一抗復(fù)合物結(jié)合?。
再次洗滌去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體?。
3. ?顯色與定量?
加入底物(如TMB),酶催化底物顯色,顏色強(qiáng)度與α-SMA濃度成正比?。
通過酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度(OD值),結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中α-SMA含量?。
4. ?關(guān)鍵應(yīng)用與優(yōu)勢(shì)?
高特異性?:針對(duì)大鼠α-SMA設(shè)計(jì),避免與其他肌動(dòng)蛋白(如β-actin)交叉反應(yīng)?。
廣泛適用性?:可檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿等樣本,適用于纖維化、腫瘤微環(huán)境等研究?。
5. ?注意事項(xiàng)?
樣本需避免反復(fù)凍融,建議分裝保存以維持蛋白穩(wěn)定性?。
高濃度樣本需稀釋,防止“鉤狀效應(yīng)"導(dǎo)致假陰性?。
該技術(shù)通過標(biāo)準(zhǔn)化流程實(shí)現(xiàn)α-SMA的精準(zhǔn)定量,為研究平滑肌細(xì)胞功能、纖維化機(jī)制等提供可靠工具?。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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