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知識分享:?胎牛血清凍存、融化相關(guān)事宜
?胎牛血清凍存和融化的注意事項主要包括儲存溫度、解凍方法、避免反復(fù)凍融、處理絮狀沉淀、分裝建議以及避免光照。?
?儲存溫度?:未拆封的胎牛血清應(yīng)儲存在-10℃至-20℃的溫度下。若沒有理想的儲存條件,也可暫時于4℃冰箱中存儲,但不建議長期存放,因為實驗表明,一個月后營養(yǎng)成分會開始下降。同時,胎牛血清也不建議存放于-80℃,因為溫度過低,瓶子容易發(fā)生破裂,導(dǎo)致血清污染?。
?解凍方法?:建議按照逐步解凍法進行解凍,即從-20℃至4℃至室溫。首先將其置于2℃至8℃的冰箱中融解,然后在室溫下使其融化。在整個解凍過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,以確保血清的穩(wěn)定性。若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),非常容易產(chǎn)生沉淀物。請勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量?。
?避免反復(fù)凍融?:血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融?。
?處理絮狀沉淀?:若血清溶解后發(fā)現(xiàn)已經(jīng)產(chǎn)生絮狀物沉淀,建議去除沉淀方法可采用400g/1-2分鐘離心或簡單的將其沉淀在瓶子底部,將血清小心地轉(zhuǎn)移至一個無菌瓶里。不建議采用過濾方式去除?。
?分裝建議?:融解后的胎牛血清應(yīng)盡快使用。若一次無法使用完一瓶血清,建議無菌分裝至合適大小的無菌離心管內(nèi),并放回-20℃冷凍保存?。
?避免光照?:胎牛血清容器應(yīng)避免直接暴露于光線中,因為光照可能會降解其中的成分?。
遵循這些注意事項可以最大限度地保持胎牛血清的質(zhì)量和生物活性,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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